Comparación de la producción de lacasa, N-acetilhidróxitriptofano y esporas en cepas de Aspergillus niger y una cepa de A. nidulans Pubblico Deposited
La caracterización cuantitativa del proceso de crecimiento de los Aspergillus es de gran interés experimental y básico para poder entenderlo, modificarlo y controlarlo. Es importante el desarrollo de técnicas cuantitativas sobre substratos sólidos (placas de agar), porque la mayoría de los estudios publicados se han realizado en substratos líquidos (matraces agitados). aunque en condiciones naturales este tipo de microorganismos crece en substrato sólido y es posible que la fisiología de esporulación sea distinta entre medio líquido y sólido. En esta tesis se desarrolló una metodología cuantitativa y reproducible para medir simultáneamente las cinéticas de formación de biomasa (mg/cm'), la producción de enzima lacasa (UI/cm2), de esporas (N/cm2) y de pigmentos (UA/cm2). Con estos datos se pudieron identificar los parámetros cinéticos de crecimiento correspondientes, basados en un modelo logistico. Se desarrolló un método para evaluar cuantitativamente la actividad de lacasa con ácido gálico como sustrato Se usaron tres cepas de Aspergillus niger (C'28B25, .fuwn y flu[&) y una de A. niduluns (bluncu); las cepas esporógenas de A. niger (C28B25 y fuwn tuvieron una p (O. 14 h") y un crecimiento máximo similar (2.99 y 2.45 mg/cm' respectivamente), en tanto que, la cepa de A. niduluns creció a una mayor velocidad (p= 0.3 1 h") y se obtuvo un nivel máximo de biomasa de 1.94 mg/cm'. Cuando se analizó la producción de lacasa, se encontró que para las cepas esporógenas, tanto de A. niger como la de A. niduluns, ésta se encuentra ligada al crecimiento micelial. Por otro lado, la cepa anesporógena A. Migerpuffi no produjo lacasa ni pigmentos. Se encontró que al final del cultivo el número de esporas de las cepas que producen pigmentos permanece estable, en comparación a la cepa blanca de A. nidulans en donde se ve una disminución al final de la cinética. Se concluye que la metodología usada en el presente trabajo permite evaluar la secuencia de eventos ligados a la esporulación y comparar fenotipos distintos, que permitirán hacer un análisis fisiológico de dicha secuencia.
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